一、 基本介紹
雜交瘤技術是制備單克隆抗體的經典方法,自1975年問世以來,一直是生命科學研究和生物醫藥產業不可或缺的工具。該平臺通過將免疫細胞與骨髓瘤細胞融合,產生既能分泌特異性抗體,又能無限增殖的雜交瘤細胞,從而實現對目標抗原的特異性、持續性的抗體生產。
二、 基本原理
雜交瘤電融合技術利用高壓脈沖電場,將免疫小鼠脾細胞(B細胞)與骨髓瘤細胞進行融合,形成雜交瘤細胞。B細胞具有分泌特異性抗體的能力,而骨髓瘤細胞具有無限增殖的特性。通過電融合,將兩種細胞的優勢結合,獲得既能分泌特異性抗體,又能無限增殖的雜交瘤細胞,從而實現對目標抗原的特異性、持續性的抗體生產。
三、 核心流程
- 免疫小鼠: 使用目標抗原免疫小鼠,刺激小鼠脾臟產生特異性B細胞。
- 制備細胞懸液: 分離免疫小鼠脾細胞,與骨髓瘤細胞按一定比例混合,制備細胞懸液。
- 電融合: 將細胞懸液加入電融合儀中,施加高壓脈沖電場,促使細胞膜發生可逆性穿孔,相鄰細胞膜融合,形成雜交瘤細胞。
- 篩選與克隆: 利用HAT培養基篩選雜交瘤細胞,并通過有限稀釋法進行單克隆化,獲得穩定分泌目標抗體的雜交瘤細胞株。
- 抗體生產與純化: 擴大培養雜交瘤細胞,收集上清液,采用蛋白A/G親和層析等方法純化抗體。

四、 技術優勢
1.我們搭建了多種蛋白表達系統平臺,尤其是膜蛋白平臺,能夠為GPCR等膜蛋白的研發提供有力支持。實現天然構象和高度穩定性,有效提高抗原呈遞效率。
2.結合流式細胞術和高通量篩選技術,能夠快速篩選具有高親和力和特異性的單克隆抗體,顯著縮短篩選周期。
3.適用于GPCR、離子通道、轉運蛋白和其他多種膜蛋白靶點,具備廣泛的應用潛力和市場價值。
4.通過雜交瘤技術結合免疫原優化,有效提升抗體與膜蛋白的結合強度和特異性,確保高效識別和結合。
5.采用優化的細胞系和培養體系,保證抗體的高效表達和批量穩定制備,確保工藝可重復性和產品一致性。
- GPRC5D 抗體的篩選
- DDR1抗體的篩選

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